2 - تهیه لام های دفن شده باب خاک
آشنایی با روش نمونه برداری،
نگهداری و تهیه لام از خاک
میکرو بیولوژی و شیمی خاک حایز
اهمیت می باشند که حرف اساس شرعیات صحیح جمع آوری و نگهداری کرده و آزمایش مورد نظر
را انجام می دهیم نکته مهم اینکه خاک از جمله محیطهایی است که حتی در یک محدوده
معین ویژگیها و شرایط آن از نظر فیزیکی- بیولوژیک و شیمیایی با همدیگر تارک دارند.
مثلاً در یک حد خاص مثل بلندی پشته در مقایسه با ارتفاع کم ویژگیهای متفاوت می
باشد و حتی در یک باغچه که به ثانیه کود داده می شود جاهایی که کود بیشتری دریافت
کرده و یا کمتری دریافت کرده شرایط متفاوتی دارد، بنابراین تهیه این نمونه ها یا
به منظور اجرا آزمایشهایی میکرولوژی اجرا می شود و یا آزمایشهای شیمیایی که این
تاخت تفاوتی کوچک از نظر جمع اوری و نگهداری دارند. برای نمونه برداری و تجمع آوری از
دستگاههای نمونه بردار خاصی آگلر استعمال می شود که اغلب نوعی لوله نمونه برداری
است که طول و قطر مشخص دارد و کالا آن عموماً فلزی می باشد و ویژگی که دارند روی
روی آنها درجهبندیشده شده است که به منظور اندازه گیری از عمق مورد استفاده قرار می گیرد
که به شکل عمودی بر روی نقطه ای که برای استنباط نمونه مشخص شده است قرار افسرده است
و با تنگی ادا کردن دست یا فشارمکانیکی در خالک فرورفته تا عمق مورد نظر ازخاک پر می
شوند و بعد محتویات آنها حرف یک کاسه ترجیحاً استریل یا یک کیسه پلاستیکی منتقل می
شوند.
مرحله دوم نگهداری الگو ها می باشد
که اگر مجبور به نگهداری شویم بایستی نمونه های جمع آوری شده در شرایطی که از نظر
دما و رطوبت تشابه زیادی با زمان استنباط نمونه دارند نگهداری شوند که درمثل در
مورد نمونه های میکروبی دمای مشابه دمای برداشت نمونه مناسب بوده که فعالیت میکرو ارگانسیم ها را کند
می کند در مورد آزمایشهای شیمیایی روشهایی مانند یخبسته کردن و خشک کردن برای
نگهداری مورد نظر می باشد .
مرحله انجام آزمایش:
برای آغاز کار ابتدا یک نقطه مناسب
را برای برداشت نمونه در نظر می گیریم و در بار آغاز باید یک برچسب تهیه کرده و
مشخصات دقیق جایگاه برداشت الگو را روی آن برچسب می نویسیم یعنی اینکه اگر برای
استنباط ازنو نیاز باشد بایستی بتوانیم نمونه برداری را عیناً تکرار کنیم که بتدریج
فناوریهای جدید مثل GPS نیز مورد استفاده قرار می گیرد در درجه دوم ویژگیها ظاهری خاک را بایستی یادداشت کنیم که شامل: سنخ دانه بندی
خاک- پستی و یا بلندی - خشکی و دیگر مشخصات و بعد از مدتی که مراجعه کردیم متوجه
تغییرات ثانیه شویم معمولاً این برچسبها حاوی تاریخ، شرایط اقلیمی، نام نمونه بردار و
تمام اطلاعات دیگری که لازم بوده و به سمت تفسیر نتایج آزمایش کمک کند می باشد.
اجرا آزمایش:
پس از تحویل ستاندن وسایل مورد نیاز
شامل یک کیسه نایلون تمیز و دماسنج و تیغه محل نمونه برداری پس آزمایشگاه کنار
درخت بزرگ زبان گنجشک و اقبال شمال غربی آن تعیین گردید و ضمن مراجعه در محل با
استعمال از استوانه مخصوص که برای نمونه برداری پیش بینی شده بود با فشار مکانیکی در
محل مناسبت نظر اقدام به سمت نمونه برداری و تخلیه آن داخلا یک پلاستیکی گردید البته
پیشازاین با استعمال از دما سنج مخصوص و با فرو کردن آن در داخل و ایست چند دقیقه ای
درجه حرارت خاک تعیین گردید آنگاه درجه حرارت هوا نیز پیمانه گیری
و بود.
پشت از ثبت مشخصات شامل 1- نام الگو بردار: علی اکبر نوروزی 2- ساعت 15/15 روز
دوشنبه 3/12/84 3- مکان: آموزشکده محیط زیست پس آزمایشگاه میکرولوژی جنب درخت
بزرگ لسان گنجشک و قسمت شمالی آن 4- درجه تاب هوا 5-
پایه حرارت خاک 6-
شرایط اقلیمی : آتمسفر مرطوب و پس از حدود ده ساعت بارندگی متناوب
در مرحله بعد از تحویل ستاندن یک عدد
بوکال ( وسیله قراردادن خاک و خمیده ها و تماس آنها با همدیگر به غرض ایجاد تماس
درخور محیط کشت با خاک) و 6 عدد خمیده یا اسلاید که با استفاده از میکروفیلم آنها را به هم چسباند هو نفوذ ناپذیری آن را
تضمین می کنیم که یک طرف آنها را حرف سواپ که قبلاً با استفاده از محیط کشت نوترینت
براث (NB) آغشته می
کنیم ( در شرایط استریل)
پس از آماده کردن سه عدد اسلاید دو
طرفه که یک جانب ثانیه آغشته به محیط کشت NB می باشد آنها را با بعد باب داخل بوکال قرار
می دهیم و سپس با استفاده از قاشقک میان آنها را با آرامی حرف خاک پر می نماییم و
درب بوکال را بسته و در دمای گرما
گذاری می کنیم که ار شرایط دمای اطاق این باشد مطلوب است در غیر اینصورت آن را
داخل انکوباتور به مدت تاخت هفته قرار می دهیم تا میکروارگانیم ها روی ثانیه رشد کند.
عنوان آزمایش: الف) شمارش باکتریهای
هتروتروف هوازی خاک به سمت آیین plate
count
هدف: آشنایی با آیین کلاسیک شمارش
باکتریهای زنده
تاریخ: 10/12/84
اجرا آزمایش:
باکتریها غالبترین جمعیت
میکروارگانیم های خاک را تشکیل می دهند و باب خاکهای معمولی بین عدد
در تمام گرم خاک موجود می باشند در خاکهای فاضلاب و کثافت فعال یا کشاورزی یا کود دهی
بالا حرف میکروبی بالایی دارند.
استعمال از رفتهای متوالی و کشت در
پلیت به سمت روش pour plate می باشد
خاک بدلیل اینکه دارای باکتریهای زیادی می باشد برازنده کشت بصورت مستقیم نمی باشد
لذا آغاز سوسپانیون را تهیه و حرف استفاده از
مایع مناسب که آسیبی به سلولها نرساند جرم جماد را وارد آن می کنیم و با
استفاده از روشهای مکانیکی آن را به سمت هم می زنیم یا حرف استفاده از دستگاهی بنام shaker که
حرف دور آشکار ( مثلاً 2000RPM یادویست
دور در دقیقه ) به مدت ده دقیقه که سلولها به هم چسبیده سوا و آونگ شوند البته این
آیین اضافه بر خاک در مواد غذایی نیز مورد
استفاده دارد . روش مناسب دقیق سازی تهیه وقتهای متوالی است که مایع مناسب برای آن
سرم فیزیولوژیک یا آب مقطر می باشد.